Luciferīns ir parasts bioluminiscējošais reportieris, ko izmanto luciferāzes ekspresijas in vitro attēlveidošanai. Šis ūdenī šķīstošais Firefly luciferāzes enzīma substrāts (parasti no Photinus pyralis) izmanto ATP un Mg2+ kā kofaktorus, lai skābekļa klātbūtnē emitētu raksturīgu dzelteni zaļu emisiju.
Ko dara D-Luciferin?
Luciferīns ir parasts bioluminiscējošais reportieris, ko izmanto luciferāzes ekspresijas attēlveidošanai in vivo . Šis ūdenī šķīstošais ugunspuķu luciferāzes enzīma substrāts izmanto ATP un Mg2+ kā kofaktorus, lai skābekļa klātbūtnē emitētu raksturīgu dzelteni zaļu emisiju., kas in vivo pārslēdzas uz sarkano gaismu 37°C temperatūrā.
Kas ir D-Luciferin kālijs?
Sīkāka informācija. D-Luciferīna kālija sāls ir noderīgs substrāts enzīmam Firefly Luciferase. Oksidējoties ar enzīmu luciferāzi, rodas bioluminiscence. D-luciferīnu var izmantot, lai pārbaudītu luciferāzes gēna ekspresiju, kas saistīts ar interesējošo promotoru.
Kā jūs gatavojat D-Luciferin?
1. Pagatavojiet 200X luciferīna izejas šķīdumu (30 mg/ml) sterilā ūdenī. Viegli samaisiet, apgriežot, līdz luciferīns ir pilnībā izšķīdis. Izmantojiet nekavējoties vai sadaliet to alikvotā veidā un sasaldējiet -20°C turpmākai lietošanai.
Kā jūs injicējat luciferīnu?
(Luciferīnu parasti ievada vai nu intraperitoneāli vai intravenozi.) Piemērs: injicējiet ar 10 µLLuciferīna izejas šķīdums uz gramu ķermeņa svara (parasti ~ 200 µL 20 g pelei standarta 150 mg/kg injekcijai). 5. Pirms attēlveidošanas uzgaidiet 10–20 minūtes, lai iegūtu maksimālo luciferāzes signāla plato.
