Kā deaktivizēt tripsīnu?

Satura rādītājs:

Kā deaktivizēt tripsīnu?
Kā deaktivizēt tripsīnu?
Anonim

Kad šūnas ir atdalītas, pievienojiet 2 tilpumus iepriekš uzsildītas pilnīgas augšanas barotnes, lai inaktivētu tripsīnu. Uzmanīgi izkliedējiet barotni, vairākas reizes ar pipeti velkot pa šūnu slāņa virsmu, lai nodrošinātu >95% šūnu atgūšanu.

Kā pārtraukt tripsīna darbību?

Tripsīna gremošanu var apturēt, sasaldējot vai pazeminot reakcijas pH zem pH 4, pievienojot skudrskābi, etiķskābi vai trifluoretiķskābi (tripsīns atgūs aktivitāti, kad pH ir paaugstināts virs pH 4). Sagremotos paraugus var uzglabāt -20°C.

Kas neitralizē tripsīnu?

Buferis satur kalcija un magnija jonus arī palēninās tripsīna darbību. Tomēr FBS ir efektīvāks veids, kā inhibēt tripsīna aktivitāti.

Vai serums inaktivē tripsīnu?

Serums inaktivē tripsīna atlikumu, kas paliekno nieru fermentatīvās gremošanas, un proteolītiskos enzīmus, ko pēc tam sintezē šūnas. Svaigi tripsinizētas šūnas var izaudzēt līdz vienslāņiem bez seruma ar nosacījumu, ka tās tika atkārtoti mazgātas, lai noņemtu tripsīna atlikumus.

Cik daudz datu nesēja nepieciešams, lai deaktivizētu tripsīnu?

Kamēr kopā ar tripsīnu izmantojat vismaz 1:1 5-10% serumu saturošu barotni, ir jābūt vairāk nekā pietiekamai inhibīcijai, kam seko centrifugēšana. un vidēja apmaiņa ar svaigu barotni.

Ieteicams:

Interesanti raksti
Kāpēc es situ bumbu no nūjas papēža?
Lasīt vairāk

Kāpēc es situ bumbu no nūjas papēža?

Pārāk liels svars uz pirkstiem var izraisīt ķermeņa pretsvaru lejupslīdes laikā, kas liek jums atsist golfa bumbiņu no papēža vai pat no pirksta. Lai labotu, jums ir jājūtas tā, it kā jūsu pēdu velvēs būtu lielāks svars šajā adresē. Kāpēc es situ pa dzelžu papēdi?

Vai kāds ir saņēmis mantojuma lauskas?
Lasīt vairāk

Vai kāds ir saņēmis mantojuma lauskas?

Jā, jūs varat. Patiesībā Apex Packs ir gandrīz vienīgais veids, kā iegūt mantojuma lauskas. Katrā iepakojumā var būt dažādi laupījumi, un mantojuma lauskas ir diezgan zemā sarakstā (ar mazāk nekā 1 % iespējamību). Žēluma taimeris nodrošina, ka spēlētājs saņem vienu mantojuma lauskas komplektu par katriem 500 Apex iepakojumiem, ko viņi atver.

Kas ir namur vārsts?
Lasīt vairāk

Kas ir namur vārsts?

NAMUR vārsti tiek izmantoti kā pilotvārsti, lai vadītu izpildmehānismu daudzos plūsmas procesos. Tie ietver gāzu, šķidrumu un beztaras materiālu, piemēram, pulveru vai graudu, dozēšanu un izlaišanu, sajaukšanu un sadalīšanu, kā arī padeves slēgšanu.