Tomēr, kad emisijas spektri pārklājas, var tikt konstatēta vairāk nekā viena fluorohroma fluorescence. Lai labotu šo spektrālo pārklāšanos, tiek izmantots fluorescences kompensācijas process. Tas nodrošina, ka konkrētā detektorā konstatētā fluorescence rodas no fluorohroma, kas tiek mērīts.
Kāpēc mums nepieciešama kompensācija plūsmas citometrijā?
Kompensācija ir nepieciešama plūsmas citometrijas eksperimentam fluorescences fizikas dēļ. Fluorohroms ir ierosināts un izstaro fotonu dažādos viļņu garumos. Daži no šiem fotoniem izplūst otrajā detektorā, izraisot atsevišķu krāsotu paraugu dubulto pozitīvu izskatu.
Kāds ir galvenais kompensējošās šūnas izmantošanas mērķis?
Primārais mērķis ir ļaut izmērīt patieso fluorescenci primārajā kanālā, kas ir piesārņots ar blakus esošo fluoroforu izplatīšanos. Tāpēc kompensācija koriģē fluorescences “pārkāpumu” starp fluoroforiem. Tomēr tas nav ideāls un nevar novērst visas nevēlamās sekas.
Kas ir kompensācijas matrica?
Kompensācijas matrica tiek aprēķināta, izmantojot vienas krāsas fluorescējošās vadības failus, kas tiek savākti ImageStream vai FlowSight, apkopojot visus kanālus un ja nav spilgta lauka apgaismojuma vai SSC.
Kas ir spektrālā kompensācija?
Izmantojot spektrālokompensācija nozīmē, ka signāls no neprimāriem detektoriem joprojām tiek izmantots, lai, kur iespējams, uzlabotu marķieru patieso signālu. Primārie kontroles paraugi tiek izmantoti parametru nosaukšanai. … Primārajos detektoros izmantotie paraugi arī palīdz nosaukt šos parametrus pēc spektrālās kompensācijas.
