Ir ļoti svarīgi apzināties, ka ar Western blot iegūtie dati parasti tiek uzskatīti par daļēji kvantitatīviem. Tas ir tāpēc, ka tas nodrošina relatīvu olb altumvielu līmeņa salīdzinājumu, bet ne absolūtu daudzuma mērījumu.
Vai Western blot ir kvalitatīvs vai kvantitatīvs?
Western blot ir uzticama kvantitatīvā metode tikai tad, ja tiek ņemtas vērā parauga īpašības un integritāte, antivielu specifiskums pret mērķa proteīnu un ielādes protokoli. Rūpīgi pievēršoties detaļām, varat izvairīties no izplatītām kļūdām un nepareizas Western blot datu interpretācijas.
Kāda veida metode ir Western blot?
Vesterna blots ir laboratorijas metode, ko izmanto, lai noteiktu specifiskas olb altumvielu molekulas no proteīnu maisījuma. Šis maisījums var ietvert visus proteīnus, kas saistīti ar noteiktu audu vai šūnu tipu.
Vai Western blot var noteikt kvantitatīvi?
Western blots tiek noteikts ar antivielām, kas specifiskas pret mērķa proteīnu, kas ir zināmas kā primārās antivielas. … Tomēr ir iespējams arī izmantot Western blotēšanu, lai nodrošinātu precīzu proteīnu kvantitatīvo noteikšanu paraugos un novērtētu proteīnu ekspresijas līmeņu izmaiņas (2).
Vai Western blot var kvantitatīvi noteikt proteīnus?
Pēc šūnu līzes ir svarīgi noteikt kopējo proteīna koncentrāciju paraugā. Precīza parauga kvantitatīvā noteikšana ļaus ielādētpareizs olb altumvielu daudzums katrā joslā.
