Restrikcijas gremošanas produktu var viegli uzglabāt pie -20 C. Pie 4 C tas būtu labi, bet lai nodrošinātu, ka nav aktivitātes un zvaigžņu aktivitātes ieteicams to turēt -20 C.
Kā jūs uzglabājat sagremoto DNS?
Izmēģiniet gēla šķēli uz nakti uzglabāt ledusskapī vai pat izkausējiet šķēli buferšķīdumā un sasaldējiet -20°C vai -80°C. DNS sadalīšanās notiks tādā pašā ātrumā un tādos pašos apstākļos kā šķīstošā DNS, tāpēc ilgākai uzglabāšanai izmantojiet aukstāku temperatūru.
Ko tas nozīmē, ka plazmīda tiek sagremota?
Attīrīta plazmīda DNS tiek sagremota ar 1 vai vairākiem restrikcijas enzīmiem (RE), kas atlasīti, lai iegūtu atšķirīgu DNS joslu modeli, ko viegli atdalīt ar elektroforēzi. … Parasti tiek atlasīti restrikcijas enzīmi, kas sagriež vairāku klonēšanas vietu (MCS) un rada diagnostikas modeli ar 2–5 viegli atdalāmām joslām.
Kā jūs glabājat linearizētas plazmīdas?
Ja uztraucaties par TE pakārtotajām sekām, uzglabājiet DNS augstākā koncentrācijā un vajadzības gadījumā atšķaidiet vai izmantojiet "zemu TE", kas ir 10 mM Tris / 0,1 mM EDTA. ja DNS vai RNS ir tīra, to var uzglabāt -20 C temperatūrā daudzus mēnešus bez jebkādas degradācijas.
Cik ilgi jūs varat saglabāt ierobežojumu apkopojumu?
Pro-Tip Atkarībā no pielietojuma un DNS daudzuma reakcijā, inkubācijas laiks var būt no 45 minūtēm līdz naktij. Diagnostikas apkopojumiem bieži pietiek ar 1–2 stundām. Sagremojumiem ar >1 µg DNS, ko izmanto klonēšanai, ieteicams sagremot vismaz 4 stundas.
