Paraformaldehīds daudzos gadījumos zināmā mērā caurlaidina plazmas membrānu - tā kā kodola apvalka membrānai ir atšķirīgs ķīmiskais sastāvs (galvenokārt holesterīna ziņā), es to nedarītu pieņemsim, ka tā ir.
Vai fiksācija samazina šūnas?
Fiksētie proteīni ap caurumiem notur rāmi stabili. Tomēr jebkura veida fiksācija var novest pie ļoti nelielas sarukšanas jūsu šūnām, ko jūs var nepamanīt.
Ko izmanto šūnu caurlaidībai?
Permeabilizācija tiek ieviesta pēc tam, kad šūnas ir sagatavotas ar fiksējošu līdzekli, lai uzsāktu proteīnu šķērssavienojumu, piemēram, formaldehīdu vai etanolu. … Divi visizplatītākie līdzekļi, ko izmanto šūnu membrānas caurlaidībai, ir mazgāšanas līdzekļi Triton-X 100 vai Tween-20, un Tween-20 ir saudzīgāks no abiem.
Ko paraformaldehīds nodarīja šūnām?
PFA izraisa kovalentas šķērssaites starp molekulām, efektīvi salīmējot tās kopā nešķīstošā tīklā, kas maina šūnas virsmas mehāniskās īpašības. Iepriekšējie pētījumi liecina, ka pēc fiksācijas apstrādes šūnu virsma sacietē [7–10].
Kā jūs veicat šūnu caurlaidību?
Šūnu caurlaidība ar metanola vai acetona fiksāciju vai ar mazgāšanas līdzekli ļauj antivielām iziet cauri šūnāmmembrānu un iekļūt šūnā. Visbiežāk izmantotais reaģents šūnu caurlaidībai ir nejonu mazgāšanas līdzeklis Triton X-100.
