Jo lielāka molekulmasa, jo garāka ir spole un jo lēnāk iet molekula. Tātad elektroforēze + SDS atdala, pamatojoties uz molekulmasu, nevis pamatojoties uz dabisko lādiņu. Svarīga piezīme: vienāda garuma olb altumvielas parasti nevar atdalīt ar gēla elektroforēzi + SDS.
Kā atdalīt olb altumvielas ar vienādu molekulmasu?
Centrifugēšana, elektroforēze un hromatogrāfija ir visizplatītākie proteīnu attīrīšanas un analīzes paņēmieni. Centrifugēšana atdala olb altumvielas, pamatojoties uz to sedimentācijas ātrumu, ko ietekmē to masa un forma.
Kādas metodes atdala proteīnus pēc maksas?
Proteīnus var atdalīt, pamatojoties uz to neto lādiņu, izmantojot jonu apmaiņas hromatogrāfiju. Ja proteīnam ir tīrs pozitīvs lādiņš pie pH 7, tas parasti saistās ar lodīšu kolonnu, kurā ir karboksilāta grupas, turpretim negatīvi lādētam proteīnam nebūs (4.4. attēls).
Kura no tālāk norādītajām metodēm ir vispiemērotākā proteīnu atdalīšanai pēc molekulmasas?
Hromatogrāfijas metodes, kuru pamatā ir sadalīšana, ir ļoti efektīvas mazo molekulu atdalīšanai un identificēšanai kā aminoskābes, ogļhidrāti un taukskābes. Tomēr afinitātes hromatogrāfijas (ti, jonu apmaiņas hromatogrāfija) ir efektīvākas makromolekulu kā nukleīnskābju un olb altumvielu atdalīšanā.
Kāda veida kolonnahromatogrāfija atdala olb altumvielas, pamatojoties uz molekulmasu?
Gēla filtrācijas (GF) hromatogrāfija atdala olb altumvielas, pamatojoties tikai uz molekulāro izmēru. Atdalīšana tiek panākta, izmantojot porainu matricu, kurai molekulām sterisku iemeslu dēļ ir dažādas piekļuves pakāpes, t.i., mazākām molekulām ir lielāka piekļuve un lielākas molekulas tiek izslēgtas no matricas.
